Název: Objemově regulované aniontové kanály u astrocytů - in vitro and in situ analýza
Překlad názvu: Volume-regulated anion channels in astrocytes- in vitro and in situ analysis
Autoři: Harantová, Lenka ; Anděrová, Miroslava (vedoucí práce) ; Vargová, Lýdia (oponent)
Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok: 2012
Jazyk: eng
Abstrakt: [eng] [cze]
Astrocytes need to preserve constant volume in the face of osmolarity perturbations to function properly. To regain their original volume after hyposmotically induced swelling, they extrude intracellular electrolytes and organic osmolytes, such as inorganic ions, excitative amino acids or polyols, accompanied by osmotically driven water. This process is termed regulatory volume decrease and is ensured by various ion channels and transporters. Recently, much attention has been focused on the ubiquitous volume-regulated anion channels activated by cell swelling. VRACs are moderately outwardly rectifying with intermediary conductance, permeable to inorganic anions and organic osmolytes and sensitive to broad-spectrum anion channels blockers. Using patch-clamp technique we aimed to characterize VRACs in cultured cortical astrocytes isolated from neonatal Wistar rats and to elucidate the effect of intracellular Na+ on VRAC activity. In addition, we also intended to characterize these channels in situ in brain slices of 10 - 12 days old rats, focusing mainly on hippocampal astrocytes. To induce astrocytic swelling, we exposed astrocytes to hypotonic solution (250 mOsm). In agreement with previous findings, we showed that cultured cortical astrocytes activate VRAC currents upon exposure to hypotonic stress, which... Astrocyty musí být schopné udržet si stálý objem navzdory měnící se osmolaritě vnějšího či vnitřního prostředí, aby mohly správně fungovat. V hypotonickém prostředí nasávají vodu a zvětšují svůj objem. Ke snížení objemu na původní hodnotu pak u astrocytů slouží vypouštění intracelulárních anorganických a organických osmoticky aktivních částic, jako jsou například anorganické ionty, excitační aminokyseliny nebo polyoly, což vede k výtoku vody z buňky. Tento proces nazývaný regulační snižování objemu je zajišťován různými iontovými kanály a přenašeči. Relativně nedávno se do centra pozornosti dostaly objemově regulované aniontové kanály (VRAC). VRAC se vyznačují mírnou vnější usměrněností, střední vodivostí, propustností pro anorganické anionty a organické osmolyty a citlivostí k širokospektrým blokátorům aniontových kanálů. Naším cílem bylo pomocí metody terčíkového zámku charakterizovat VRAC v astrocytárních kulturách z neonatálních potkanů Wistar a objasnit, jaký vliv má intracelullární Na+ na aktivitu těchto kanálů. Dále jsme se zabývali charalterizací VRAC in situ v mozkových řezech 10 - 12 denních potkanů a to především v astrocytech v hipokampu. Zvyšování buněčného objemu jsme dosáhli aplikací hypotonického roztoku (250 mOsm). Ukázali jsme, že v souladu s dříve publikovanými daty, astrocytární kultury...
Klíčová slova: histochemie; hypotonický stres; imunocyto; metoda terčíkového zámku; primární kultury; regulace buněčného objemu; tkáňové řezy; VRAC; cell volume regulation; histochemistry; hypotonic stress; immunocyto; patch-clamp; primary cultures; tissue slices; VRAC

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/41133

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-305435


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Diplomové práce